Bioquímica Analítica
Código
7300
Unidade Orgânica
Faculdade de Ciências e Tecnologia
Departamento
Departamento de Química
Créditos
6.0
Professor responsável
Carlos Alberto Gomes Salgueiro, Maria Alice Santos Pereira
Horas semanais
5
Total de horas
64
Língua de ensino
Português
Objectivos
É objectivo desta disciplina introduzir os métodos bioquímicos e espectroscópicos usados na caracterização bioquímica, estrutural e espectroscópica de proteínas.
Pré-requisitos
É obrigatório que os alunos tenham realizado, com aproveitamento, as disciplinas de Bioquímica Geral, Quimíca Analítica e Métodos de Separação.
Conteúdo
1. Análise e quantificação de biomoléculas
1.1. Análise qualitativa versus análise quantitativa
1.2. Parâmetros usados na identificação e quantificação de biomoléculas
2. Estratégias usadas no isolamento e purificação de proteínas - casos especiais
2.1. Estratégia a usar versus objectivo do estudo
2.2. Proteínas recombinantes
2.2.1. Expressão e preparação da amostra
2.2.2. Expressão de proteínas membranares
2.2.3. Expressão e purificação de complexos multiproteicos
3. Análise de proteínas por aplicação da espectroscopia de Ressonância Paramagnética Electrónica
- Fundamentos teóricos e aplicações
4. Métodos de análise de hidratos de carbono
4.1. Métodos químicos versus métodos enzimáticos
4.2. Separação e identificação de misturas de hidratos de carbono
5. Métodos de análise de lípidos
5.1. Preparação da amostra
5.2. Métodos quantitativos
5.3. Separação de misturas de lípidos
6. Bioanálise por aplicação de técnicas de ressonância magnética: RMN e RMI
6.1. RMN: princípios teóricos
6.1.1. RMN mono e multidimensional
6.1.2. Marcação isotópica de amostras
6.1.3. Aplicações em bioquímica
6.2. RMI: princípios teóricos e aplicações
7. Protein folding
7.1. Termodinâmica do processo de desnaturação: modelos propostos
7.2. Curvas de estabilidade: efeito temperatura e desnaturantes químicos
7.3. Mecanismos de folding
7.4. Protein folding in vitro versus in vivo
7.5. Doenças associadas a protein unfolding
8. Espectrometria de massa
8.1. Princípios teóricos
8.2. Espectrometria de massa tandem
8.3. Aplicações
9. Métodos imunológicos
9.1. Interacção anticorpo-antigene
9.2. Aplicação analítica dos marcadores biológicos
9.3. Aplicação dos métodos radioimunológicos
Bibliografia
1. ANALYTICAL BIOCHEMISTRY
David J. Holme and Hazel Peck
Prentice Hall, Third Edition, 1998
2. BIOANALYTICAL CHEMISTRY
Susan R. Mikkelsen and Eduardo Cortón
Wiley-Interscience, John Wiley & Sons, Inc., 2004
3. BIOANALYTICAL CHEMISTRY
Andear Manz, Nicole Pamme and Dimitri Iossifidis
Imperial College Press, 2004
4. PHYSICAL BIOCHEMISTRY. PRINCIPLES AND APPLICATIONS
David Sheehan
Wiley-Blackwell, Second edition, 2009
5. UNDERSTANDING BIOANALYTICAL CHEMISTRY. PRINCIPLES AND APPLICATIONS
Victor A. Gault and Neville H. McClenaghan
Wiley-Blackwell, Second edition, 2009
6. GE Healhtcare Life Science Handbooks
http://www.gelifesciences.com/aptrix/upp01077.nsf/content/service_and_support~documents_and_downloads~handbooks
Método de ensino
- Aulas teóricas, teórico-práticas e práticas
Método de avaliação
Só serão admitidos para avaliação teórica, os alunos que tenham obtido frequência à disciplina.
A frequência à disciplina é dada pela frequência obrigatória:
i) a todas as sessões de laboratório
ii) entrega dos 2 relatórios (por grupo)
iii) 70% das aulas teóricas e teórico-práticas
Avaliação da componente prática
Terá a contribuição de:
i) Pontualidade, preparação e execução das aulas de laboratório
ii) Avaliação dos 2 relatórios
Avaliação da componente teórica
A avaliação da componente teórica será efectuada pela realização de 3 testes teóricos
Nota da disciplina
40% nota da componente prática + 60% nota da avaliação da componente teórica
- A aprovação à disciplina requer uma nota ≥ 9,5 valores em cada uma das componentes, teórica e prática.