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Faculdade de Ciências e Tecnologia

Técnicas de Laboratório em Biologia II

Código

8143

Unidade Orgânica

Faculdade de Ciências e Tecnologia

Departamento

Departamento de Ciências da Vida

Créditos

6.0

Professor responsável

Ana Madalena Peres de Drumond Ludovice Mendes Gomes, Rita Gonçalves Sobral de Almeida

Horas semanais

5

Total de horas

68

Língua de ensino

Português

Objectivos

No fim do semestre está previsto que os alunos tenham adquirido as seguintes competências: (1) Descrever e explicar as bases moleculares associadas às diversas técnicas abordadas durante o curso. (2) Distinguir e descrever as diversas técnicas de biologia molecular que são utilizadas para isolar, purificar e caracterizar ácidos nucleicos (princípios de electroforese em gel (agarose), mapas de restrição, PCR, hibridação de ácidos nucleicos e sequenciação). (3) Comparar e contrastar as diferentes metodologias descritas ao longo do curso. Associar criticamente estas diferenças ao objectivo final pretendido. (4) Diante de uma questão biológica específica, identificar a abordagem experimental que melhor se adequa à resolução do problema. (5) Analisar e interpretar resultados experimentais de forma crítica e clara. Apresentar os resultados sob a forma de um relatório científico. (6) Assimilar a importância da evolução técnica ao longo dos anos, como as metodologias estão limitadas tecnicamente pelo conhecimento do momento. (7) Perceber que a biologia molecular e celular é uma área em constante atualização, sempre na fronteira dos últimos avanços a nível experimental. (8) Adquirir competências necessárias para subsequentemente frequentar as Unidades Curriculares de Genética Molecular e Engenharia Genética.

Pré-requisitos

Recomenda-se fortemente a frequência e aprovação nas disciplinas de Técnicas Laboratoriais de Biologia I e Biologia Celular.

Conteúdo

Introdução aos laboratórios de biologia molecular. Principais riscos associados e protocolos de segurança.

 

Técnicas de Biologia Molecular

- métodos de extracção e purificação de ácidos nucleícos.

- análise quantitativa e qualitativa de ácidos nucleicos.

- electroforese de ácidos nucleicos.

- restrição enzimática e mapas de restrição para análise genética.

- transformação de bactérias com moléculas de DNA plasmídico.

- análise por PCR – escolha de primers e condições de reacção.

- introdução aos métodos de sequenciação de DNA.

- sequênciação de genomas.

- métodos de análise de transcritos.

- métodos de análise de proteínas. 

Bibliografia

- Brown, T.A. Gene cloning and DNA analysis - an introduction. 6th ed.  Wiley-Blackwell. 2010.

- Alberts, B., Johnson, A., Lewis, J., Raff, M., Roberts, K., Walter, P. Molecular Biology of the Cell. 6th ed. Garland Science, New York, USA, 2008.

- Reed, R., Holmes, D., Weyers, J., Jones, A. Practical Skills in Biomolecular Sciences. 2nd ed. Pearson Education Limited, Essex, UK, 2003.

- Cantor, C.R. and Smith, C.L. Genomics: The Science and Technology Behind the Human Genome Project. John Wiley & Sons, 1999.

- Sambrook J., and D. W. Russell. (2001) Molecular Cloning - A Laboratory Manual. 3rd Edition. Cold Spring Harbor Laboratory Press. New York.

- Protocolos detalhados para cada sessão laboratorial.

- Artigos científicos. 

Método de ensino

A componente teórico-prática integra o enquadramento teórico das técnicas, metodologias e concepção experimental.

O curso prático de TLB II decorre em laboratório, com acompanhamento e execução de experiências essenciais no uso directo de técnicas moleculares e cito-moleculares. Integra igualmente a análise e discussão dos resultados obtidos.

Método de avaliação

Para ter acesso a avaliação, o aluno tem de assistir a 2/3 das aulas práticas e a 2/3 das aulas teórico-práticas.

A Classificação Final da disciplina é obtida considerando:

- Um relatório escrito sob forma de artigo científico, realizado por cada grupo. A avaliação deste relatório contribui em 30% para a classificação final (6/20 valores).

- Dois testes parciais ou Exame de Recurso, sendo os conteudos em avaliação as matérias teóricas e práticas,  contribuirão em 70% para a classificação final (14/20 valores).

- A média aritmética dos dois testes parciais deverá ser igual ou superior a 9.5 valores.

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